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    細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC/PI)
    • 產品貨號:
      DEM251
    • 中文名稱:
      細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC/PI)
    • 品牌:
      BIODEE
    • 貨號

      產品規格

      售價

      備注

    • DEM251-20T

      20T

      ¥750.00

      生化分析試劑盒

    • DEM251-50T

      50T

      ¥1500.00

      生化分析試劑盒

    產品描述

    產品簡介
    細胞凋亡是細胞的基本生理活動之一,在機體胚胎發育、免疫系統成熟、組織修復和內環境穩定等方面發揮十分重要的作用。 Annexin V 是一種分子量為 35.8 KD 的 Ca2+依賴性磷脂結合蛋白,能夠與凋亡過程中從細胞膜內翻轉到細胞膜外的的磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine, PS)高親和力和高特異性結合。利用異硫氰酸熒光素標記的 Annexin V(Annexin V-FITC)結合到 PS 上,在藍色光的激發下,發出綠色熒光,可以區分凋亡細胞和正常細胞。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種核酸染料,它不能穿透完整細胞膜,但對凋亡晚期細胞和壞死細胞的破損細胞膜能夠穿透,并使細胞核紅染。將 Annexin V-FITC 與 PI 聯合使用,利用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測可以將凋亡早期細胞與凋亡晚期細胞及壞死細胞區分開來(由于流式細胞儀具有更高的檢測靈敏度,推薦使用流式細胞儀檢測)。

    試劑盒組成

    組份編號 組份名稱 規格 數量
    DEM251-1 Binding Buffer (10×) 5 ml/瓶 1
    DEM251-2 Annexin V-FITC 250 μl/管 1
    DEM251-3 Propidium Iodide (PI) 250 μl/管 1
    說明書 1


    需要而未提供的材料
    1. 細胞
    2. 超純水和細胞培養用
    PBS
    3. 系列可調節量程移液器及吸頭
    4. 干凈的試管、離心管及組織培養板
    5. 臺式離心機、流式細胞儀
    儲存條件
    4 ℃避光儲存, 保質期 12 個月。

    注意事項
    1. 初次使用試劑盒時,小體積液體試劑請適當離心后使用。
    2. 流式細胞測定時,注意設置不染色對照樣品、
    Annexin V-FITC PI 單染樣品,設置儀器參數。
    3. 本產品僅限專業人員用于科學研究,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。
    4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

    使用說明
    1. 收集經過各種干預因素處理的待測細胞,調整細胞濃度至 5×105-1×106/ml,取 1 ml 細胞懸液,4,250g
    離心 5 分鐘,棄上清。
    2. 加入
    1ml 冰浴預冷的 PBS,輕輕振蕩使細胞懸浮, 4,250g 離心 5 分鐘,棄上清。
    3. 加入
    250 μl Binding Buffer (提前用純水稀釋為 1×)重懸細胞,然后加入 5 μl Annexin V-FITC,輕輕混勻,避光室溫反應 15 分鐘。
    4. 加入
    5 μl PI,輕輕混勻,避光室溫反應 5 分鐘。
    5. 加入
    250 μl Binding Buffer (1×),利用流式細胞儀 FITC PI 通道檢測細胞凋亡。

    數據處理
    檢測完成后可以直接利用流式細胞儀自帶軟件處理數據,生成 PDF 文件,然后截屏需要的流式細胞圖,
    并對凋亡細胞比例進行統計分析;另外可以保存
    FCS 文件,利用 Flowjo 等流式數據處理軟件對流式細胞
    圖進行處理,如下圖所示。

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    參考文獻
    1. M. Vogler, H. A. Hamali, X. M. Sun, et al. 2011. BCL2/BCL-XL inhibition induces apoptosis, disrupts cellular calcium homeostasis, and prevents platelet activation. Blood, 117: 7145-7154.


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