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    實時熒光定量PCR試劑盒
    • 產品貨號:
      DEM202
    • 中文名稱:
      實時熒光定量PCR試劑盒
    • 品牌:
      BIODEE
    • 貨號

      產品規格

      售價

      備注

    • DEM202-50T

      50T

      ¥350.00

      生化分析試劑盒

    • DEM202-200T

      200T

      ¥1150.00

      生化分析試劑盒

    產品描述

    產品簡介

    本產品含雙封閉法BioDee Top Taq熱啟動酶、優化的雙陽離子緩沖液、SYBR Green Ⅰ熒光染料、dNTPs、PCR 增強劑、 PCR 穩定劑。本產品濃度為 2×,使用時只需加入模板、引物和水,即可進行反應。
    本產品使用的雙封閉法 BioDee Top Taq 熱啟動酶,具有極高活性和特異性,能夠獲得高質量測定數據。


    試劑盒組成

    組份編號 組份名稱 規格 數量
    DEM202-1 BioDee SYBR Green qPCR SuperMix(2×) 1.25 ml/管 4
    DEM202-2 ddH2O 10 ml/瓶 1
    說明書 1


    需要而未提供的器材
    1. 系列可調節量程移液器及吸頭
    2. 干凈的試管、離心管及 PCR 八聯管或 96 孔板
    3. 實時熒光定量 PCR 儀(適用于無需 ROX 熒光染料校正的儀器)


    儲存條件
    -20℃儲存, 保質期 12 個月。


    注意事項
    1. BioDee SYBR Green qPCR SuperMix(2×) 使用前冰浴化凍,徹底化凍并混合均勻后使用。
    2. 本產品僅限專業人員用于科學研究,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。

    3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


    使用說明
    1. 請按下表配制 qPCR 反應體系

    組份 體積
    BioDee SYBR Green qPCR SuperMix(2×) 25 μl
    Template 0.1-2 μl
    Forward Primer (10 μM) 1 μl
    Reverse Primer (10 μM) 1 μl
    ddH2O variable
    Total volume 50 μl

    注:對于 mRNA 的定量測定,請檢測 GAPDH、 β-actin 或 β-tubulin 等管家基因做內參,為了節省試劑,可以將反應體系縮減為 20 或 25 μl 反應體系。
    2. 完成反應體系配制后,將裝有試劑的八聯管或 96 孔板放入 qPCR 儀中,按以下程序進行 qPCR 測定。

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    待測定反應完成,一方面記錄各樣品的循環閾值(Cycle threshold, Ct),另一方面注意觀察產物熔解曲線(Melt Curve)是否是尖銳的單峰及熔解溫度(Tm)是否接近引物設計時的預測溫度,以確定擴增反應的特異性。

    數據處理
    qPCR 對模板的定量主要是通過 Ct 值來確定,模板數量越多, Ct 值越小,模板數量越少, Ct 值越大。對于病毒、細菌或真菌核酸定量,可以通過標準品來進行絕對定量;對于人及動物細胞 mRNA 的定量,可以利用內參基因來進行相對定量。


    參考文獻
    1. P. Smyth, O. Sheils, C. Martin, J. O’Leary, E. C. Sweeney, 2001. Real-time quantitative analysis E-cadherin
    expression in ret/PTC-1-activated thyroid neoplasms. Int J Surg Pathol. 9 (4): 265-272.
    2. L. Simoncini, M. Casiraghi, C. Bazzocchi, L. Sacchi, C. Bandi, C. Genchi, 2001. Real-time PCR for
    quantification of the bacterial endosymbionts (Wolbachia) of filarial nematodes. Parassitologia. 43 (4):173-178.


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